Analisis Bersepadu Aroma Kopi dengan menggunakan Headspace GC-HRMS - Membangunkan Teknik Analisis Bersepadu menggunakan Data Diperolehi oleh GC/EI dan GC/Pengionan Lembut - [Aplikasi GC-TOFMS]
MSTips No.280
Pengenalan
Pengionan elektron (EI) ialah kaedah pengionan keras yang biasa digunakan dengan spektrometri jisim kromatografi gas (GC-MS). Corak pemecahan spektrum jisim yang dihasilkan oleh EI digunakan untuk carian pangkalan data perpustakaan untuk mengenal pasti sebatian. Sebaliknya, kaedah pengionan lembut seperti pengionan medan (FI) cenderung menghasilkan ion molekul yang jelas dengan pemecahan yang minimum. Apabila MS resolusi tinggi digunakan dengan teknik pengionan ini, jisim tepat untuk ion serpihan yang dihasilkan oleh EI dan ion molekul yang dihasilkan oleh pengionan lembut memberikan dimensi tambahan maklumat untuk analit. Menggabungkan maklumat jisim yang tepat dengan hasil carian perpustakaan konvensional boleh meningkatkan ketepatan pengenalan berbanding dengan penggunaan carian perpustakaan sahaja. Dalam kerja ini, kami memperkenalkan perisian msFineAnalysis dan menggunakannya untuk menggabungkan data yang diperoleh secara automatik oleh GC/EI dan GC/pengionan lembut untuk analisis kualitatif ruang kepala kopi.
Eksperimen
Kopi komersial disediakan seperti berikut:
1) Satu gram biji kopi dimuatkan ke dalam vial 22 mL, 15 mL air mendidih ditambah, dan vial itu dimeteraikan.
2) Selepas sampel disejukkan ke suhu bilik, 10 mL supernatan dimuatkan ke dalam botol lain, dan 2 µL larutan rujukan dalaman (p-Bromofluorobenzene) telah ditambah kepada sampel.
3) Akhir sekali, 2 mL larutan di atas dipindahkan ke tabir untuk pensampel ruang kepala dan dimeterai dalam botol yang kemudiannya digunakan sebagai sampel.
Jadual 1 menunjukkan keadaan ukuran yang digunakan untuk ruang kepala/sistem GC-TOFMS.
Jadual 1. Syarat Pengukuran
| sistem | MS-62070STRAP (JEOL) |
|---|---|
| mod | Mod perangkap |
| Mengekstrak | 3 kali |
| Keadaan pemanasan | 60°C, 15min |
| sistem | JMS-T200GC (JEOL) |
|---|---|
| Mod pengionan | EI+: 70eV, 300μA, FI+: -10kV, 8mA (Carbotec 5μm) |
| Lajur GC | ZB-WAX, 30m x 0.18mm, 0.18μm |
| Suhu ketuhar. | 40°C (3min)→30°C/min→250°C(10min) |
| Suhu masuk. | 250 ° C |
| Mod masuk | Bahagi 30:1 |
Hasil dan Perbincangan
Rajah 1 menunjukkan carta aliran operasi untuk langkah analisis bersepadu yang digunakan untuk perisian JEOL msFineAnalysis (carta di sebelah kanan). Pertama, data diperoleh dengan menggunakan kedua-dua EI dan pengionan lembut (SI), dan semua puncak dan spektrum jisim yang berkaitan dikesan dalam kromatogram. Selepas itu, spektrum jisim yang dihasilkan oleh kaedah pengionan ini dikaitkan menggunakan masa pengekalannya, dan spektrum jisim yang dipautkan ini direkodkan sebagai komponen tunggal. Seterusnya, spektrum jisim EI digunakan untuk carian pangkalan data perpustakaan (1), dan spektrum jisim SI digunakan untuk mengenal pasti ion molekul analit (2). Selepas itu, ion molekul digunakan untuk analisis jisim tepat untuk menentukan komposisi unsur yang mungkin, dan formula calon ini kemudiannya ditapis dengan menggunakan hasil carian perpustakaan EI (3). Seterusnya, ion molekul tertakluk kepada analisis corak isotop untuk membantu mengehadkan lagi formula calon (4). Setiap formula calon kemudiannya digunakan sebagai kekangan carian untuk analisis jisim yang tepat bagi ion serpihan EI (5). Jika calon formula ion molekul tidak betul, ion serpihan EI tidak akan menghasilkan banyak (jika ada) formula komposisi, dengan itu menunjukkan bahawa formula ion molekul bukan calon yang baik untuk analit tertentu itu. Keputusan ini kemudiannya dikeluarkan sebagai laporan kualitatif bersepadu (6).
Rajah 1. Aliran Analisis Kualitatif
Rajah 2. Kromatogram TIC aroma kopi yang diperolehi oleh HS/GC/TOFMS
Rajah 3. Keputusan analisis kualitatif bersepadu pada msFineAnalysis
Fungsi Analisis Auto msFineAnalysis mengesan 67 komponen dalam ukuran GC/EI dan GC/FI (Rajah 2) yang dipautkan secara automatik menggunakan masa pengekalannya. Fungsi Auto Analysis kemudian secara automatik menggunakan langkah-langkah dalam Rajah 1 untuk menganalisis data yang dipautkan, dan hasilnya dikeluarkan sebagai jadual berkod warna seperti yang ditunjukkan dalam Rajah 3. Setiap warna menunjukkan tahap keyakinan untuk identiti kompaun:
Hijau: Calon formula molekul dikenal pasti secara unik.
Jingga: Berbilang calon formula molekul telah dikenalpasti.
Putih: Tiada calon formula molekul penting dikenal pasti.
Komponen yang diklasifikasikan sebagai oren atau putih boleh disemak selanjutnya secara manual untuk mengenal pasti formula calon yang unik. Dalam contoh ini, perisian itu dapat secara automatik menentukan formula molekul unik untuk 63 daripada 67 komponen dalam sampel ruang kepala kopi.
kesimpulan
Perisian msFineAnalysis menghasilkan keputusan analisis kualitatif yang sangat tepat dengan menggabungkan secara automatik hasil carian perpustakaan EI dan penentuan formula molekul pengionan lembut (SI). Selain itu, perisian ini membolehkan untuk menentukan formula molekul untuk komponen yang tidak diketahui yang tidak didaftarkan dalam perpustakaan (skor faktor padanan: rendah), yang tidak boleh dikenal pasti melalui carian pangkalan data sahaja (Rajah 1, sebelah kiri). Keberkesanan kaedah analisis bersepadu msFineAnalysis untuk analisis kualitatif GC/MS ditunjukkan dengan secara automatik menentukan formula molekul daripada jisim tepat, tanpa mengira tahap skor faktor padanan, untuk mengehadkan formula calon.
- Sila lihat fail PDF untuk mendapatkan maklumat tambahan.
Tetingkap lain terbuka apabila anda mengklik. 
PDF 1.17MB
Produk Berkaitan
Rumusan berdasarkan bidang
Adakah anda seorang profesional perubatan atau kakitangan yang terlibat dalam penjagaan perubatan?
Tidak
Sila diingatkan bahawa halaman ini tidak bertujuan untuk memberikan maklumat tentang produk kepada orang ramai.