Analisis struktur melatonin dan sebatian berkaitan menggunakan JMS-S3000 SpiralTOF™ dengan pilihan TOF-TOF [Aplikasi MALDI]
MSTips No.256
Pengionan desorpsi laser berbantukan matriks (MALDI) menggunakan sebatian berat molekul rendah (LMW) yang dipanggil matriks untuk meningkatkan kecekapan pengionan. MALDI sering digunakan dalam kombinasi dengan spektrometer jisim masa penerbangan reflectron (TOF-MS), tetapi mengukur sebatian organik LMW dengan m/z 500 dengan teknik ini secara amnya dianggap sukar. Pertama, bukan sahaja sebatian sasaran tetapi juga matriks dan komponen pencemar lain diionkan dan diperhatikan dalam spektrum jisim, dan resolusi jisim yang tidak mencukupi menjadikannya sukar untuk memisahkan puncak ini apabila menggunakan TOF-MS jenis reflectron. Kedua, ion pereputan pasca sumber (PSD) juga diperhatikan sebagai ion latar belakang di kawasan jisim rendah spektrum jisim.
JMS-S3000 SpiralTOF™, yang mempunyai sistem optik ion orbital lingkaran yang dipatenkan JEOL, mempunyai jarak penerbangan jauh 17 m dan boleh mencapai resolusi jisim tinggi. Di samping itu, sektor elektrostatik yang membentuk sistem optik ion boleh mengecualikan ion JPA, menjadikannya mungkin untuk memperoleh spektrum jisim yang kurang dipengaruhi oleh ion latar belakang. Ciri-ciri ini membolehkan pengukuran jisim yang tepat walaupun di kawasan LMW[1].
Sebatian LMW yang serupa dalam struktur kepada sebatian sasaran sering juga dianalisis menggunakan MS/MS dan spektrometri jisim pengimejan[2]. Apabila SpiralTOF™ digunakan dengan pilihan TOF-TOF, pengguna boleh memilih hanya ion monoisotopik ion prekursor melalui selektiviti jisim tinggi dan memerhati saluran pemecahan bermaklumat menggunakan penceraian teraruh perlanggaran tenaga tinggi (HE-CID). Dalam Nota Aplikasi ini, kami melaporkan analisis MS/MS melatonin, metabolitnya 5-methoxytryptamine, dan N-acetylserotonin, yang merupakan perantaraan sintetik melatonin daripada serotonin.
Eksperimen
Dalam analisis ini kami menggunakan reagen standard melatonin, 5-methoxytryptamine, dan N-acetylserotonin (Rajah 1), menyediakan setiap satunya sebagai larutan metanol 1 mg/mL. Untuk matriks, kami menggunakan asid 2,5-hidroksibenzoik (DHB) yang dilarutkan dalam metanol. Sampel dan larutan matriks dicampur pada 1: v/v. Kami menjatuhkan 1 μL larutan campuran ke plat sasaran dan biarkan ia kering di udara. Spektrum ion produk diperoleh menggunakan mod ion positif TOF-TOF.
Hasil
Spektrum ion produk ion monoisotopik [M+H]+ melatonin, 5-methoxytryptamine, dan N-acetylserotonin ditunjukkan dalam Rajah 2.
Corak spektrum keseluruhannya adalah serupa, jadi kami menganggapnya sebagai sebatian dengan struktur yang serupa. Kami memerhatikan puncak ciri m/z 174 hanya dalam melatonin dan 5-methoxytryptamine; satu lagi puncak ciri, m/z 43, hanya dilihat dalam melatonin dan N-asetilserotonin. Saluran pemecahan ketiga-tiga sebatian ditunjukkan dalam Rajah 3. Puncak bagi m/z 174 u sepadan dengan C2H5NO dan NH3 kehilangan neutral daripada melatonin dan 5-methoxytryptamine, masing-masing, dan menjadi ion serpihan struktur yang sama. Dalam N-acetylserotonin, kami memerhatikan C2H5TIADA puncak kehilangan neutral pada m/z 160. Puncak di m/z 43 sepadan dengan C2H3O+ dan diperoleh daripada struktur biasa melatonin dan N-asetilserotonin.
Kesimpulan
Adalah mungkin untuk menganalisis struktur serupa bagi sebatian LMW yang berbeza dengan menganalisis spektrum ion produk HE-CID yang diperoleh menggunakan SpiralTOF™ dengan pilihan TOF-TOF. Menggunakan teknik ini, kami menganalisis bahagian terminal melatonin dan sebatian yang berkaitan.
Rujukan
- [1] MSTips 241. "Analisis sifat perubatan dalam gabungan ubat selsema dengan menggunakan JMS-S3000 SpiralTOF™."
- [2] MSTips 212. "MS pengimejan MALDI resolusi jisim tinggi untuk metabolisme ubat dalam tisu menggunakan JMS-S3000."
Rajah 1. Formula struktur melatonin, 5-methoxytryptamine, dan N-acetylserotonin.
Rajah 2. Spektrum ion produk melatonin, 5-methoxytryptamine, dan N-acetylserotonin.
Rajah 3 Saluran pemecahan melatonin, 5-methoxytryptamine dan N-asetilserotonin
- Sila lihat fail PDF untuk mendapatkan maklumat tambahan.
Tetingkap lain terbuka apabila anda mengklik. 
PDF 588KB
Produk Berkaitan
Adakah anda seorang profesional perubatan atau kakitangan yang terlibat dalam penjagaan perubatan?
Tidak
Sila diingatkan bahawa halaman ini tidak bertujuan untuk memberikan maklumat tentang produk kepada orang ramai.