Mari cuba lakukan NMR kuantitatif

Dalam tujuh isu sebelumnya, kami telah memperkenalkan gambaran keseluruhan, termasuk latar belakang NMR kuantitatif. Daripada isu ini kami akan membentangkan kandungan praktikal.

Persediaan

Sebelum benar-benar melakukan pengukuran NMR kuantitatif, terdapat beberapa persediaan yang diperlukan terlebih dahulu. Ini adalah (1) memilih kaedah pengukuran kuantitatif (kaedah piawai dalaman atau kaedah piawai luaran), (2) menentukan keadaan penyediaan sampel (pemilihan pelarut dan piawai rujukan untuk qNMR, kestabilan larutan sampel), dan (3) mengesahkan bahawa isyarat yang sesuai untuk kuantifikasi muncul pada ¹Spektrum H-NMR. Di sini, kami akan memperkenalkan secara ringkas pemilihan kaedah pengukuran kuantitatif.
Untuk kaedah piawai dalaman, piawai rujukan untuk qNMR disediakan dalam larutan yang sama dengan analit. Bagi kaedah piawai luaran, piawai rujukan bagi qNMR dan analit disediakan secara berasingan. Perkara yang perlu dipertimbangkan semasa memutuskan kaedah untuk dipilih ialah sama ada ketepatan atau pemulihan sampel mempunyai keutamaan yang lebih tinggi. Jika anda ingin menekankan ketepatan, kaedah standard dalaman adalah disyorkan. Sebaliknya, jika bahan berharga yang merupakan bahan terpencil tunggal sedang dianalisis, kaedah standard luaran mungkin lebih baik.

Rajah.2 Kaedah standard dalaman dan luaran

Skim Analisis NMR Kuantitatif

NMR kuantitatif dengan sama ada kaedah standard dalaman atau kaedah standard luaran mempunyai tiga langkah:
Penyediaan sampel → ukuran NMR → Analisis.

Rajah 1 carta alir analisis qNMR

1) Kaedah standard dalaman (Gamb.3 Prosedur untuk kaedah standard dalaman)

Penyediaan Sampel: Sahkan ketepatan baki yang akan digunakan, timbang dengan tepat piawai rujukan untuk qNMR dan analit. Adalah disyorkan untuk membuat 3 sampel dari lot yang sama.
Pengukuran NMR: Lakukan pengukuran 1H di bawah keadaan yang dioptimumkan untuk kuantifikasi. Salah satu parameter yang perlu diberi perhatian ialah tetapan masa ulangan nadi. Tetapkan masa ulangan yang cukup lama berdasarkan T1 (masa kelonggaran membujur). Kami mengesyorkan anda melakukan tiga ukuran pada setiap sampel qNMR.
Analisis: Apabila memproses FID, beberapa pemprosesan boleh dilakukan secara automatik, tetapi disyorkan agar anda menyemak melalui pemeriksaan visual.

Rajah.3 Prosedur untuk kaedah standard dalaman

2) Kaedah standard luaran (Gamb.4 Prosedur untuk kaedah standard luaran)

Penyediaan Sampel: Sahkan ketepatan baki yang akan digunakan, timbang dengan tepat piawai rujukan untuk qNMR dan analit secara berasingan. Dalam kes ini, adalah penting untuk mengetahui kepekatan molar yang tepat bagi piawai rujukan untuk kuantifikasi.
Pengukuran NMR: Pengukuran dilakukan dalam keadaan kuantitatif, tetapi penentukuran seperti suhu dan ukuran lebar nadi adalah perlu untuk membandingkan spektrum penyelesaian rujukan dan spektrum penyelesaian sampel analitik.
Analisis: Seperti kaedah standard dalaman, pemeriksaan visual selepas pemprosesan adalah perlu. Semasa mengira, bergantung pada parameter pengukuran setiap sampel qNMR, pengiraan mesti termasuk faktor penentukuran.

Rajah.4 Prosedur untuk kaedah standard luaran